お客さまの声／データ紹介　二次元電気泳動関連製品

【データ紹介】　1件

• 帝京大学 医学部 生化学講座
  有冨 桂子 先生、久樹 晴美 先生、石塚 稲夫 先生

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帝京大学 医学部 生化学講座
有冨 桂子 先生、久樹 晴美 先生、石塚 稲夫 先生

DeStreak Reagent を使用した感想

• DeStreak Reagent をImmobiline™ DryStrip の膨潤液に添加することにより、二次元電気泳動のpH 7以上の塩基性側のパターンが大幅に改善された。
• 塩基性側のタンパク質に着目したいときは、DTTよりもDeStreak Reagent が適している。
• DTT と異なり、DeStreak Reagent は液体のため、秤量が容易である。

実験方法

[サンプル]

マウス精巣抽出タンパク質

[実験条件]

一次元目等電点電気泳動

泳動装置	Ettan™ IPGphor™
ゲル	Immobiline™ DryStrip pH 3-10, 13 cm
膨潤液	7 M Urea、2 M Thiourea、 1％ Pharmalyte™ pH 3-10、2.5 mM acetic acid、0.2％ Triton X-100 上記に下記(1)20mM DTT、(2)DeStreak Reagent, 12 µl/ml のいずれかを添加した
泳動条件	膨潤：　10時間 泳動ステップ1：　500 V, 1 hr 泳動ステップ2：　1,000 V, 1 hr 泳動ステップ3：　8,000 V, 16,000 Vh ※電流は50 µAで制御

二次元目等電点電気泳動（SDS-PAGE）

泳動装置	13 cm用縦型電気泳動装置（バイオクラフト社）
ゲル	SDS/Native両用トリス塩酸ゲル（ゲル濃度12.5%、バイオクラフト社）
染色	SYPRO™ Ruby Protein Gel Stain （Invitrogen社）
検出	FluorImager SI Excitation：488 nm、Filter：610RG

結果

[収量の比較]

DeStreak Reagent を使用した場合の泳動パターン	DTT を使用した場合の泳動パターン

結果についてのコメント

DeStreak Reagent の使用によって塩基性側のストリーキング（横筋）が大幅に改善され、タンパク質スポットがフォーカスした。これまでDTT を使用した系では分離できなかった塩基性タンパク質が、DeStreak Reagent により解析可能になる。酸性側の分離はDTT の方がやや優れているように思われた。