一時的にカラム耐圧を越える圧力がかかってしまったことはありませんか？ または担体の構造に悪影響をおよぼす溶媒を使っていませんか？ カラム上部に隙間ができるとサンプルが希釈されたり、均一に添加できなくなったりします。 カラムメンテナンスを行いましょう。