i、ImageQuant™ LAS 4000、ImageQuant™ LAS 4010
UV透過光源で検出が可能な蛍光色素には次のようなものがあります。
- エチジウムブロマイド （蛍光フィルター：605DF40）
- SYPRO™ Ruby （蛍光フィルター：605DF40）
ここで使用するフィルターの605DF40とは、バンドパスフィルターで、中心波長605 nm±20 nmの光を50 %の効率で透過するフィルターです。SYPRO™ Rubyは図1からも分かるように、その蛍光特性から460 nmの青色落射光とY515のフィルター（515 nm以上の波長を透過させるフィルター）の組み合わせでも検出できます。そのため、UV透過光源による励起でも同等の感度で検出することが可能です（図2）。蛍光フィルターの使用によって、UV光そのものやノイズをカットすることができます。ゲルを置くトレイは底が透明なUV-Transトレイ（図3）を使用します。
図1 SYPRO™ Rubyの吸収波長と発光波長
図2 ImageQuant™ LAS 4000シリーズを使用して撮影したゲル画像
左：UV透過光源、 605DF40フィルター使用。
1,200-10,000 RFU。
右：青色落射光源、Y515Diフィルター使用。
1,000-3,000 RFU。
（露光時間1/2）
図3 UV-Transトレイ
CBB染色、銀染色のゲルなど可視染色のサンプル（Digitize）
●対応機種：ImageQuant™ LAS 4000mini（オプション）
UV透過光源の上に、キャリブレーション用のプレート（Calibration Plate GR、図4左）を置き、白色透過光源として検出に使用することができます。
この場合も蛍光検出時と同様に、605DF40フィルターをレンズ下のマニュアルフィルターチェンジャーにセットして検出します。
ゲルを置くトレイは底が乳白色のWhite-Transトレイ（図4右）を使用します。
標準的なCBB染色、銀染色のゲルの検出時の露光時間は、1～3秒程度です。
ゲル（図5）の他、ディッシュ上で培養されたコロニーの簡易的な検出も可能です。
図4 キャリブレーション用のプレート（左）とWhite-Transトレイ（右）
図5 CBB染色ゲルのDigitize
装置：ImageQuant™ LAS 4000mini
光源：UV透過光源にキャリブレーションプレートGRを置き、白色光源として使用
フィルター：605DF40
露光時間：5秒
落射UV光源（365 nm）
蛍光色素の検出
●対応機種：ImageQuant™ LAS 4000（オプション）、ImageQuant™ LAS 4010（オプション）
落射UV光源は主に光を透過しない素材、メンブレンやTLCプレートなどの検出に使用されます。
この場合に使用するトレイは金属性で黒色のEPIトレイ（図6）を使用します。
落射UV光源に適した蛍光色素には次のようなものがあります。
- SYPRO Rose（蛍光フィルター：L41）
- Qdot™（蛍光フィルター：L41）
L41フィルターはUV光カット用のロングパスフィルターで、410 nm以下の短波長側の光をカットし、長波長側の光を透過させます。
ImageQuant™ LAS 4000シリーズによる検出の際には、ゲルやメンブレンをGel sheet (LAS)などの上に置くことで、中心合わせが行いやすくなります。
また、エチジウムブロマイドによる汚染の機会も減らすことができます。
図6 EPIトレイ
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