HPLCサンプル調製用の再生セルロース製メンブレンフィルター

高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分析を効率的に行うためには、分析対象の正確な検出を妨げる微粒子の除去が必要です。シリンジフィルターによるHPLC前のサンプルろ過は不純物を減少させますが、使用するフィルターからの溶出物が新たな汚染物質として混入する危険性があります。

溶媒に対する化学的適合性に基づいて、適切な素材を用いたシリンジフィルターを選択することにより、新たな汚染物質がHPLC分析を妨げるリスクを低減することができます。

サンプル調製の一般的な方法とは？

HPLC分析を正確に行うためには、純度を可能な限り高め、サンプル濃度が確実に検出範囲内となるようにするために、適切なサンプル調製を行うことが重要です。サンプル調製に用いられる一般的な方法は、以下となります。

希釈
遠心分離
ろ過

個々のサンプルの希釈または遠心分離は、HPLCサンプル中の不溶性粒子を除去するのに十分であるかもしれません。ろ過デバイスを使用したサンプルのろ過は、不溶性粒子をフィルターにより物理的に分離することが可能で、不規則なクロマトグラムのピークを防ぐことができます。Whatman™のシリンジフィルターとシリンジレスフィルターは、オートサンプリング用の複数サンプルの前処理にお勧めです。

しかしながら、ろ過デバイスの素材がサンプル調製に使用される溶媒に対して十分な耐性を持たない場合、データの品質に影響を及ぼす可能性のある物質が溶出します。

溶出物とは？

溶出物とは、サンプル溶媒と接触する構成部材（例えば、フィルターメンブレンまたはハウジング）から放出される化合物です。溶出物の量は、素材の溶媒耐性、ならびに温度および圧力に依存して変化します。

溶出物のHPLC分析への影響とは？

これらの化学物質が、その下流の分析法で検出されうる物質である場合は、HPLC分析に影響を及ぼす可能性があります。溶出物はデータノイズを高める可能性があり、データ品質を低下させ、不要なHPLC分析のトラブルの原因となります。特に、溶出物が分析対象と同じリテンションタイムとなる場合、問題になります。

溶出物の量がフィルター毎にばらつきがあり、溶出速度も一定ではない場合、この状況を分析において明らかにすることは非常に困難となります。

溶出物を減らすのに必要なことは？

HPLCで使用される移動相溶媒に対して高い化学的適合性を持つろ過メンブレンを選択することが重要です。 ポリテトラフルオロエチレン（PTFE）、ポリフッ化ビニリデン（PVDF）および再生セルロース（RC）メンブレンが、精製水、アセトニトリル、およびメタノールなどの一般的な移動相溶媒に対する耐薬品性が高いため、一般的に選択されています。

また、ろ過メンブレンに含まれる溶出物のレベルについてメーカーからデータを入手することをお勧めします。そのようなデータが利用できない場合、ブランクサンプル（すなわち、移動相溶媒のみからなるサンプル）を用いて試験することにより、適したメンブレンを選択することができます。

実際のろ過工程では、シリンジフィルターを通した最初の1 mLまたは2 mLの溶液を捨てることをお勧めします。ほとんどの溶出物はこれらの最初のろ液中に溶出されるためです。

他に考慮すべきことは？

ラボ全体でフィルターの素材を揃えることで、全体的な一貫性が得られます。フィルター素材を揃える1つの方法は、1つまたは2つのメンブレンタイプ（PTFEまたはRCなど）で標準化し、それらを様々なフォーマットで使用することです。例えば、移動相ろ過用の円形メンブレンフィルター、マニュアル調製用のシリンジフィルター、および自動ろ過用のシリンジレスフィルターなどで同じ素材のメンブレン製品を使うことができます。

標準化のもう1つの利点は、消耗品の在庫を減らせることです。 事実、様々なハウジングとメンブレン素材のあらゆる組み合わせをストックすることは、困難であり、経済的でもありません。

再生セルロースは、他のメンブレンタイプと比べていくつかの利点があります。RCの利点についてはこちらをご覧ください。

私のサンプルにはどの素材のメンブレンを使用すべきですか？

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フィルター材料の特性および化学薬品耐性についてのアドバイスは、下記お問い合わせフォームよりお気軽にご連絡ください。

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