はじめに
Biacore™ Insight Softwareは、Biacore™ 1シリーズ、8シリーズ共通のソフトウェアですが、Biacore™ T200、S200のデータ解析も可能です。便利なレポートアウト機能や豊富な追加解析機能（Extension）があるため、Biacore™ T200、S200ユーザーの間でも使用される方が増えています。詳細は「Biacore™共通解析ソフトウェアご存じですか？」をご覧ください。
今回、Biacore™ T200/S200 Evaluation Softwareには無かった、痒いところに手が届くBiacore™ Insight Softwareならではの機能を紹介します。
Reference Settings
シリアルフローセル（Multi）でFc1,2,3,4などを用いて測定を行った場合、解析前にリファレンスセルを変更することができます。Fc3-2なども含め、大きな番号からの差し引きについてすべて対応可能です（Figure 1）。
- ブランクのFcとネガティブサンプルでブロッキングしたFcなど、2種類のリファレンスセルを設定して、アナライト毎に適切なリファレンスセルを選択したい。
- リファレンスセスの処理によるセンサーチップへの非特異結合の違いを比較したい。
Figure 1：Reference Settings
Biacore™ Insight Evaluation Softwareで、データを開いた後、HomeのPropertiesからReference Settingsができます。
Sensorgram typeからReference/Activeの切り替えが可能。
Sensorgramsから評価可能なセンサーグラムを確認。
Injection assignment
センサーグラムにおけるAnalyte (Sample)以外のInjection Commandを対象に解析を行うことができます（Figure 2）。
- Dual Commandを用いた解離のpH依存性評価について、1:1 dissociationによるフィッティング解析でkdを求めたい（Figure 3）
- 変数はCaptureの濃度だけれど、Analyte (Sample)のレスポンスを評価したい
- 変数はAnalyte (Sample)の濃度だけれど、Enhancement injectionのレスポンスを評価したい
Figure 2： Injection assignment
各Evaluation itemにおけるSettingsからInjection assignmentができます。
Use variable information from：解析時に使用する変数（濃度）
Use response values from：解析対象となるInjection Command部分
Figure 3：Dual Command を用いたADCs のpHに依存した解離速度の評価
細胞外（pH 7.4）、エンドソーム内（pH 6.0）の環境を模倣した二種類のpHで解離の違いを測定。
Initial values
フィッティング解析による初期値にDriftが追加されています。また、ほかのEvaluation Softwareと異なり、RIの初期値が0になっています。
- Drift：ベースラインドリフトは本来、0濃度（ブランク）サイクルで補正すべきですのでデフォルトではConstant 0になっています。もし、0濃度サイクルがきれいに取れず十分な補正ができなかった場合、変数として扱うこともできます。
- RI：溶液効果などの影響でアナライト添加前後に段差が残るケースがあります。通常はダブルサブトラクションで限りなく0に近い値となり、結合解離の速い箱形センサーグラムを誤評価することがあるため、デフォルトではConstant 0になっています。もし、段差部分がきれいに消えていない場合、変数に変えることもできます。
Figure 4：Initial values
各Evaluation - kineticsにおけるSettingsからInitial valueの確認・変更ができます。
DriftおよびRIについては、ランニングバッファーで適切に希釈されたアナライト溶液を用い、0濃度（ブランク）も設定がされていれば、基本的にはデフォルト（Constant 0）のまま変更する必要はありません。もし、十分なダブルサブトラクションができなかったセンサーグラムであっても、フィッティング結果を参照したい際は変数にしてください。
今回、Biacore™ T200/S200 Evaluation Softwareにはない、Biacore™ Insight Softwareの細かな機能に関してご案内しました。Biacore™ 1シリーズ、8シリーズのユーザーの方も是非ご活用ください。