ECL WesternBlotting Reagent 製品写真

各ECL™ シリーズ試薬の特徴

ECLの検出原理
ECL™ の検出原理

ECL Plus/Advanceの検出原理
ECL™ Plus／ECL Advance™ の検出原理

ECL Plexの検出原理
ECL Plex™ の検出原理

ECL™ シリーズ試薬　検出感度・ダイナミックレンジの比較

ここでは、ECL™シリーズの検出感度や定量ダイナミックレンジについて比較しました。サンプルとして5 ngから段階的に2倍希釈したヒトapotransferrinを各レーンに添加し、各ECL™シリーズ試薬で検出を行いました。

図：至適化条件におけるECL™ シリーズ試薬の検出感度比較

  • サンプル：5 ngから段階的に2倍希釈したヒトapotransferrin
  • 検出：Typhoon™（ECL Plex™）、Hyperfilm™ ECL™（その他）
  • 一次抗体：rabbit polyclonal anti-human transferrin
  • 二次抗体：ECL Plex™ goat-α-rabbit-Cy5（ECL Plex™）、donkey-α-rabitt IgG HRP-linked（その他）

検出感度　ECL™ ＜ ECL™ Plus ＜ ECL Plex™ ＝ ECL Advance™

ECL™シリーズの中では、ECL Advance™が最も高い検出感度を示します。本データでは、ECL Plex™と検出感度に大きな差は見られませんが、一般的にはECL Advance™の方が高い検出感度を有します。

定量の直線性とダイナミックレンジ　ECL™ ＜ ECL Advance™ ＜ ECL™ Plus ＜ ECL Plex™

蛍光検出であるECL Plex™が最も高い定量性を示します。ECL™ Plusは反応が安定していることもあり、定量性は比較的高いです。他の化学発光検出についても、ImageQuant™のようなCCDイメージャーにより検出することで、さらに定量性を高めることができます。

抗体の経済性　ECL™ ＜ ECL Plex™ ＜ ECL™ Plus ＜ ECL Advance™

ECL Plex™は検出限界感度は高いものの、一次抗体が比較的多く必要であることに注意してください。単に検出感度を求めるだけでなく、抗体を効率的に使用したい場合にも、上位試薬を用いる価値があります。

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『他のECL™シリーズ試薬へ切替える際のポイント』

ウェスタンブロッティングで十分なパフォーマンスが得られない場合、皆さまはどうしていますか？

ご利用のECL™試薬から検出感度の高いECL™シリーズ試薬に移行することも、解決方法のひとつです。
条件検討だけでは解決しないとお悩みの方は、「検出感度が高い手法へ変える際のポイント」をご参照ください。

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