●PreScission™ Protease認識配列を持ったpGEX Vector(pGEX-6P-1、pGEX-6P-2、pGEX-6P-3)で発現させたGST融合タンパク質を切断
●切断反応の至適温度が5℃ なので、融合タンパク質の活性を損なわない穏やかな条件での切断が可能
●PreScission™ Protease自身がGST融合タンパク質(1)なので、切断後はプロテアーゼを含まない目的タンパク質のみの回収が可能
●認識配列:Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln ↓ Gly-Pro(2)

PreScission™ ProteaseはGSTとヒトライノウイルス3Cプロテアーゼの融合タンパク質であるため、Glutathione Sepharose™担体やGSTrap™ FF、GSTrap™ HPカラムを用いて切断反応液から容易に除去できます。5℃ でも十分な酵素活性があるので、目的タンパク質を安定な状態で回収できます。

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製品 包装 コード番号 価格(円)
PreScission™ Protease 500 units 27084301 33,800

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PreScission™ Protease

反応条件・活性の定義
50 mM Tris-HCl、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM DTT、pH 7.0溶液中で16時間、5℃ で処理。1 unit は100 μg のGST融合タンパク質を90% 以上切断する酵素活性と定義
濃度
2,000 units/ml(833~1,000 units/mg)
供給状態
50 mM Tris-HCl(pH 8.0)、150 mM NaCl、10 mM EDTA、1 mM DTT、20% グリセロール溶液中
保存温度
-20℃
分子量
46,000


GST融合タンパク質のPreScission™ Proteaseによる切断結果

GST融合タンパク質のPreScission™ Proteaseによる切断結果

リファレンス

1. Walker, P. A. et al., Biotechnology(NY) 12, 601 (1994).
2. Cordingley, M. G. et al., J. Biol. Chem. 265, 9062 (1990).

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